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          佰利萊生物試劑盒常用方法及原理

          更新時間:2023-04-11      瀏覽次數:313

          佰利萊生物主營產品:
          1.Elisa試劑盒系列:
          ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等。
          ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到眾多科研實驗工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。
          Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
          可檢測種屬 
          (人,小鼠,大鼠,植物,魚,蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細胞,土壤等動植物)
          可以檢測樣為
          (血清,血漿,唾液,尿液,組織,細胞上清,裂解液等)
          產品檢測目的:
          樣本水平表達(定量檢測,定性檢測,酶活性檢測)
          規格:96T 可以檢測89個樣  48T可以檢測41個樣
          備注:6個標準一個空白對照
          有效期:6個月 保存2-8°C
          佰利萊生物elisa試劑盒的優點:
          一、高效、靈敏、特異的抗體;
          二、穩定的重復性和可靠性;
          三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
          四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
          五、最大限度的節省實驗經費。
          佰利萊生物常用方法及原理如下:
          1. 夾心法:
          夾心法常用于檢測大分子抗原,一般的操作步驟為:
          a. 將具有專一性的抗體固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體
          b. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結
          c. 洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一的一次抗體,與待測抗原進行鍵結
          d. 洗去多余未鍵結一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗體鍵結
          e. 洗去多余未鍵結二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結果

          原理:針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物。

          2. 間接法:

          間接法常用于檢測抗體,一般的操作步驟為:
          a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。
          b. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的一次抗體,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。
          c. 洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測的一次抗體鍵結。
          d. 洗去多余未鍵結二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評估有色終產物的含量即可測量待測抗體的含量。
          原理:利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體。
          3. 競爭法:
          競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制,一般用于檢測小分子抗原,其操作步驟為:
          a. 將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體
          b. 加入待測檢體,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結
          c. 加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結,由于塑膠孔盤上固著的抗體數量有限,因此當檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結,即所謂競爭法之由來。
          d. 洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤內留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。
          e. 當需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原,或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時,一般會考慮使用競爭法ELISA。
          原理:將特異性抗體包被于固相載體表面,經洗滌后分成兩組:一組加酶標記抗原和被測抗原的混合液,另一組只加酶標記抗原,經孵育洗滌后加底物顯色,這兩組底物降解量之差,即為所要測定的未知抗原的量。


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